仪器:氧电极系统一套;30ml针筒,剪刀,双面刀(或单面刀),1ml移液器,镊子,吸管,吸水纸,打孔器。
1准备好所需的仪器和试剂,安装好氧电极,并与计算机连接,校正(详细操作步骤见厂家提供的说明书或汉语说明书)。
2材料准备:取小麦、水稻等植物叶片(组织),用打孔器取一定面积(或称取一定重量)(一般按每ml反应体积需0.5cm2叶碎片取样),
将叶块放入盛有测定介质的小烧杯中,然后将小烧杯放到真空器中进行抽气,排出叶片(组织)细胞间隙内的气体,使叶片沉到底部。或者
将叶碎块倒入30ml注射器中,进行手工真空渗入,排除叶内气体,使叶块下沉。然后将下沉的叶块取出,用剪刀剪成面积约为2mm2的碎
在盛有叶碎片的反应杯中加入1~2 ml的测定介质,然后放入磁转子。启动磁转子搅拌溶液,平衡1分钟左右后,开始测定,3~5min后
4反应结束后,清洗反应杯。重复步骤3,所有实验结束后,按说明书操作,清洗反应杯,清洁电极,保持电极的干燥。(需要注意的几点见说明书)
5呼吸速率的计算:从记录曲线得到单位时间氧的变化量,根据叶片面积和反应介质的体积计算出样品的呼吸速率。
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